一 制备方法提要：将敌敌畏原油在以乙二醇做固定相、耐火砖为载体的色谱柱进行分离，进一步纯化采用减压蒸馏的方法。
1 试剂：敌敌畏原油、乙二醇（分析纯）、石油醚（30-60℃，分析纯）、四氯化碳（分析纯）、二乙醚（分析纯）、无水硫酸钠、耐火砖 250-355mm（40-60目）：先用蒸馏水彻底洗干净，然后用丙酮清洗，过滤待溶剂挥发后，在105℃条件下干燥，用分级筛截取250-355 mm粒度的耐火砖材料。
2 仪器：厚壁玻璃管色谱柱，规格2.5
m×50mm、旋转蒸发器、100mL馏分收集器、抽气泵：适合于石油醚-四氯化碳混合溶剂（3:2，V/V），压力为100kPa，排气量为6L/h、减压蒸馏装置：0.1 Pa，70℃条件下工作，蒸馏瓶（100 mL），具有10cm长的维格罗分馏柱，20cm冷凝器，尾端装有3分头的馏分收集器（图1）。
图1 制备型液相色谱装置
3 操作步骤：向装入2.5kg的耐火砖聚乙烯（大约厚0.1
mm）袋中加入2.5kg的乙二醇，反复颠倒混合均匀。每次取50g填料装入色谱柱中，轻轻地填实。倒入石油醚-四氯化碳混合液（用乙二醇饱和）5.5L排除柱中的气体，然后用合适的进样环在柱顶部加入80mL敌敌畏原油。以6L/h的流速用石油醚-四氯化碳混合溶剂淋洗色谱柱，放弃前2L淋洗液，用100mL分馏瓶，收集后6L淋洗液用气相色谱法测定这些馏分，通常只有在25-55号馏分瓶中有敌敌畏。用旋转浓缩器蒸掉淋洗液，用400mL二乙醚溶解剩余溶液，先后2次各用300mL水清洗二乙醚层，然后用旋转浓缩器浓缩除掉二乙醚。减压蒸馏敌敌畏，收集0.1Pa（55-60℃）条件下无色液体。收率可达50%。
二 定性鉴定
1 薄层色谱：硅胶GF254板，紫外灯254 nm显色，展开剂：二氯甲烷:丙酮= 4:1（V/V）。点样浓度为100 g/L丙酮溶液，点样5 mL，展开后应为单点。
2 敌敌畏红外吸收光谱图（涂膜）：
3 敌敌畏的1H-NMR波谱图：
4 敌敌畏的13C-NMR波谱图：
5 敌敌畏质谱图(EI)：
三 定值
1 水分含量 按照CIPAC MT 30.1方法测定，含水量<0.02 % (m/m)。
2 酸度含量测定 按照CIPAC MT 31方法，含量以H2SO4计，<0.02 % (m/m)。
3 气相色谱归一化法
色谱柱：柱长1.5 m×4 mm内径，内装3 % Reoplex 100/Gas Chrom Q 74 mm~149 mm (100~200目) 或等效者；
检测器：FID；
柱箱温度：100 ℃（2 min）
200 ℃；
载气：N2 60 mL/min；
进样量：0.1 mL敌敌畏纯品；
保留时间：约12 min。
用面积归一化法计算敌敌畏的含量。至少要称4~8个样品进样分析，符合要求后计算出平均值，减去水分，酸度含量即为敌敌畏的纯度值。
